求生之路2的故事发生在前作剧情一周后的美国东南部，主要场景包括佐治亚州的沙瓦那和新奥尔良法国区。游戏延续了四人合作求生的核心玩法，但引入了全新的幸存者阵容：橄榄球教练Coach、机械师Ellis、赌徒Nick和电视台助理Rochelle。与前作不同，二代的故事线更加连贯，五个主线章节和一个DLC共同构成了完整的逃亡旅程。
故事从死亡中心章节展开，四位主角在酒店天台错过救援直升机后，被迫前往附近的购物中心寻找逃生路线。这个章节展现了病毒爆发初期城市的混乱状态，大量感染者盘踞在商业区。当主角们抵达购物中心时，发现这里早已沦陷，他们最终驾驶一辆跑车逃离现场。在这个章节中玩家会首次遇到一代的三位幸存者，暗示了比尔已经牺牲的事实。
黑暗狂欢节章节呈现了独特的游乐场氛围，主角们因车辆抛锚而徒步穿越主题公园。为了吸引救援直升机注意，他们利用舞台灯光和烟火制造信号，这个章节的设计巧妙结合了娱乐设施与生存危机。随后的沼泽激战则将场景转向湿地区域，主角们乘坐的直升机因驾驶员感染而坠毁，被迫穿越危险的沼泽地带，最终在种植园通过无线电联系到一艘救援船只。
暴风骤雨章节以暴雨天气为特色，船只燃料不足迫使主角们冒险前往加油站寻找柴油。这个章节的环境设计突出了极端天气对求生过程的影响。教区作为最终章节，主角们抵达新奥尔良后发现军方准备炸毁桥梁防止病毒扩散，他们必须在爆炸前穿越危险区域。整个剧情通过环境叙事和对话逐步揭示病毒爆发的背景，同时保持了紧张的战斗节奏。
DLC消逝作为剧情补充，详细描述了一代与二代角色相遇的过程。这个章节通过环境细节和物品摆放暗示前作角色的命运，特别是比尔的牺牲对整个故事线产生重要影响。游戏通过多角度叙事展现了不同幸存者群体在灾难中的选择，使世界观更加完整。每个章节的过渡自然流畅，场景设计服务于剧情发展，共同构建出末日求生的沉浸体验。
