想要获得蜘蛛眼最直接的办法就是去寻找并击败蜘蛛，玩家每亲手击杀一只蜘蛛就有大约三分之一的概率从它身上掉落一个蜘蛛眼。需要注意的是如果玩家利用岩浆、火焰、高处跌落或者其他环境伤害把蜘蛛弄死，它们是绝对不会掉落蜘蛛眼的。只有玩家或者是驯服的狼等受玩家控制的生物对蜘蛛打出最后一击才会有可能掉落蜘蛛眼，如果玩家想提高效率，那么给自己的武器附魔上掠夺属性是最好的手段，附魔的掠夺等级越高，掉落蜘蛛眼的数量也会随之增加。
不想去找蜘蛛的话也可以去寻找女巫，女巫这种生物在死亡时会随机掉落很多种炼药材料，其中就包括蜘蛛眼。通常情况下击杀一只女巫有几率掉落零到六个蜘蛛眼，这个产出量比打蜘蛛要高得多。女巫通常会出现在沼泽地的小木屋里，或者是在雷雨天气的突袭事件中成群出现。如果玩家在地下矿洞探险时听到一种诡异的笑声，说明附近很可能就有女巫刷新。女巫比普通蜘蛛难打得多，她会不断向玩家扔各种负面效果的药水，建议准备好盾牌和远程武器去击杀她们。
蜘蛛眼直接吃掉会让玩家中毒四秒，但能回复两点饥饿值，在紧急时刻能保住一条小命。不过它最主要的用途还是在酿造台上制作各种药水，把蜘蛛眼塞进装有粗制的药水的酿造台里就能得到一瓶剧毒药水，这种药水在打成群的怪物时很好用。
